Isolation of PCR-ready DNA from Mycobacterial cells using magnetic particles
| Název česky | Izolace mykobakteriální DNA v kvalitě pro PCR pomocí magnetických částic |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2005 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | 11th International Symposium on Separation Sciences ISSS 2005 |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Mikrobiologie, virologie |
| Klíčová slova | Mycobacterium; DNA; PCR |
| Popis | Byly stanoveny vazebné kapacity DNA z kuřecích erythrocytů a RNA z hovězích jater na následující částice: silikagel, magnetické feritové částice a magnetické P(HEMA-co-GMA)mikročástice obsahující karboxylové skupiny. Jako nejvhodnější vazebný pufr byl zjištěn 8% PEG a 2M NaCl (konečná koncentrace). Z částic byla DNA eluována pomocí TE pufru. Získané znalosti byly využity při izolaci mykobakteriální DNA v kvalitě vhodné pro PCR. Mykobakteriální DNA byla detekována amplifikací genu dnaj. Pomocí primerů Multidnajf a MultidnaJr byl amplifikován produkt o velikosti 140 bp. Citlivost stanovení byla 5,0 x 10-3 ng/ul (5,95 x 10+2 kopií buněk). |
| Související projekty: |